Identificación de Células Eucariotas

INTRODUCCION:

Las células eucariotas poseen un núcleo definido con el material genético organizado en cromosomas. Todos los organismos multicelulares están formados por células eucariotas y también muchos organismos unicelulares y coloniales.

Material

- 1 microscopio optimo
- 5 portaobjetos
- 5 cubreobjetos
- 1 agitador
- 1 bisturí con navaja
- 1 vaso de presipitado
- 2 goteros
- 1 servilleta de papel
- 1 trozo de papel de seda
- 1 caja de petri

Sustancias

- Agua destilada
- Reactivos de Gram: cristal violeta, lugol, alcohol-cetona, safranina
- Sudan III
- Yogurt casero
- Agua de charco o de florero
- Cebolla, papa, plátano, manzana, papaya, aguacate, nuez, zanahoria, betabel
- Flores de gladiola roja

Procedimiento

Células bacterianas 

Las bacterias son células muy pequeñas (1 a 2 micrómetros ) y pueden tener forma esferica ( cocos), de bastón basilos) o de espiral (espirilos).

1. Haz un frotis de una muestra de yogurt.
2. Realiza una tincion con Gram.
3. Colocale un portaobjetos y obsérvalo a inmersión.
4. Identifica la forma de la célula, la pared y el citoplasma.
5. Dibuja los esquemas en los cuadros para resultados.

Bacterias verde-azules (cianobacterias)

Las cianobacterias son organismo procariontes fotosinteticos. la clorofila que contiene esta dispersas en el citoplasma. Ademas de la clorofila, las cianofitas poseen pigmentos accesorios (carotenoides y ficobilinas).

1. Coloca sobre un portaobjeto una gota de agua de charco estancado y verde-azul.
2. Coloca un cubreobjetos y observa al microscopio con el objetivo seco fuerte.
3. Dibuja lo observado y señala las estructuras celulares identificadas.

Pared celular y núcleos en células de catafilia de cebolla

La cebolla es un tallo del cual nacen hojas modificadas llamadas catafilias, que no poseen clorofila y almacenan gran cantidad de carbohidratos.

1. Desprende con una pinza la epidermis interna de un trozo de catafilia de cebolla.
2. Coloca una pequeña porción de la película sobre un portaobjetos, añádele una gota de agua y una de lugol y acopla un cubreobjetos.
3. Observa con los objetivos de seco débil y seco fuerte.
4. Dibuja lo observado y señala las estructuras celulares identificadas.

Cloroplastos y pared celular en células de hoja de elodea 

Las hojas de Elodea se pueden observar al MO sin ninguna preparación previa ya que están formadas por dos capas de células.

1. Coloca una hojita de elodea sobre un portaobjetos 
2. Agregale una gota de agua y colocale el cubreobjetos.
3. Observar a seco débil y fuerte.
4. Dibuja las células t señala las estructuras identificadas.

Aminoplastos en tuberculos de papa.
Los aminoplastos son plastidiosque contienen el almidón presente en el tubérculo de la papa.

1. Corta un trozo de tubérculo de papa y raspa la superficie de corte con una hoja de afeitar o de bisturí.
2. Coloca el raspado en una gota de agua y raspa sobre un cubreobjetos
3. Agrega una gota de lugol.
4. Acopla un portaobjetos y observa con los objetivos seco debil y seco fuerte.
5. Localiza los aminoplastos teñidos de azul.
6. Dibuja las celulas t señala las estructuras identificadas.

Aminoplastos en platano.
Las celulas de platano tanbien poseen aminoplastos que almacenan almidon pero que se diferencias de los aminoplastos de la papa en su morfologia.

1. Raspa una pequeña cantidad de tejido de la superificie del fruto.
2. Dispersala sobre el portaobjetos.
3. Agrega una gota de lugol.
4. Coloca un cubreobjetos y observa con los objetivos seco débil y seco fuerte.
5. Dibuja las células y señala los almidones identificados.
6. Compara la morfología de los amiloplastos de papa y de plátano.
7. Repite el procedimiento anterior con manzana y papaya. Compara la estructura de los amiloplastos.

Cromoplastos de zanahoria y betabel.
En la zanahoria y el betabel, así como en otra partes de distintas especires de plantas, se encuentran cromoplastos que contienen pigmentos amarillos, naranjas o rojos, llamdos carotenos.

1. Corta una delgada capa de tejido de la porcion mas extensa de la zanahoria.
2. Colócala sobre una gota de agua en el portaobjetos.
3. Acopla un cubreobjetos.
4. Observar con los objetivos seco debil y seco fuerte. Los cromosomas estan teñidos naturalmente.
5. Dibuja las células y señala los cromoplastos identificados.
6. Procede del mismo modo con el betabel.

Cromoplastos en flores coloridas.

Las flores coloridas de color entre azul y rojo contienen en los cromoplastos unos pigmentos llamados antocianinas.

1. Desprende la epidermis de los mas delgada posible de una flor colorida, puede ser gladiola.
2. Colocala sobre un portaobjetos con una gota de agua destilada y cubrela con el cubreobjetos.
3. Observa con los objetivos seco debil y seco fuerte.
4. Dibuja las celulas y señala los cromoplastos identificados.

Oleoplastos en celulas de aguacate o nuez

Son plastidos que almacenan aceites como reserva de compuestos energeticos.

1. Haz un raspado del aguacate (o macerado de la nuez y coloca una pequeña porcion sobre un cubreobjetos con una  gota de agua.
2. Agrega una gota del colorante de sudan III
3. Observa con los objetivos seco debil y seco fuerte. Los oleoplastos se ven de color naranja.
4. Dibuja las celulas y señala los oleoplastos identificados.

Celulas animales

1. Con un portaobjetos y muy cuidadosamente haz un raspado de la cara interna del labio inferior.
2. Extiende la masilla que quedo en el borde del portaobjetos y mezcla con una gota de agua destilada.
3. Agrega una gota de safranina y coloca el cubreobjetos.
4. Observa con los objetivos seco debil y seco fuerte.
5. Dibuja las celulas y señala las partes identificadas.

Conclusión

La practica, fue muy sencilla de realizar, nos mostró, como estan compuestos los diversos materiales que están presentes en nuestra vida diaria. 

Determinación de GCH

INTRODUCCIÓN:

La Gonadotropina Coriónica Humana (hCG) es una hormona glicoproteica producida en el embarazo, fabricada por el embrión en desarrollo poco después de la concepción y más tarde por el sinciciotrofoblasto (parte de la placenta). Su función es evitar la desintegración del cuerpo lúteo del ovario y, por ende, mantener la producción de progesterona que es fundamental para el embarazo en los seres humanos. La hCG puede tener funciones adicionales; por ejemplo, se cree que afecta a la tolerancia inmunológica del embarazo. Las primeras pruebas de embarazo, en general, se basan en la detección o medición de hCG. Debido a que la hCG es producida también por algunos tipos de tumores, es un importante marcador tumoral, pero no se sabe si esta producción es una causa o un efecto de la tumorigénesis.

MATERIAL:

1. Plaqueta.
2.Reactivo.
3.Agitador de madera.
4.Pipeta desechable.

REALIZACIÓN:

1.Colocar una gota de orina en tres de los lugares de la plaqueta.
2.Aplicar una gota de reactivo, dieferente para cada gota de orina.
3.Revolver con el agitador de madera.
4.Observar si hay agrutinacion.

RESULTADOS:

-Negativo

Retracción del Coagulo

Introducción:

El tapón hemostasico de plaquetas que se forma como resultado de la hemostasia primaria, crece hasta que consigue cerrar la abertura en el vaso. Durante este tiempo, las plaquetas del tapón metabolizan glucosa y producen atp de late energía este inicia la contracción de una proteína de las plaquetas parecida a la actinomiosina llamada trombostenina que es la causante de la retracción del coagulo. Esta retracción ocurre una vez estabilizado el coagulo, por contracción de las proteínas fibrilares del citoesqueleto plaquetario, de las glicoproteínas receptoras de membrana de la propia fibrina, el coagulo que se retrae queda firmemente adherido a la pared vascular.
Al contraerse el coagulo los hilos de fibrina se contraen gradualmente y expulsan el plasma del coagulo, aunque se retienen eritrocitos, plaquetas y otros elementos sólidos. El plasma expulsado del coagulo tiene poco o nada de fibrinógeno porque se ha convertido en fibrina y se llama suero. Para que ocurra retracción máxima del coagulo, la sangre debe poseer número adecuado de plaquetas.

Fundamento:

Al coagularse en forma espontánea la sangre, se forma una masa solida con todos los componentes sanguíneos. Con el tiempo, la acción de las plaquetas sobre la red de fibrina retrae el coagulo reduciendo su masa.

Material y aparatos: 

• Tubos de centrifuga de 10 ml graduados.
• Tapón de hule para los tubos con alambre de cobre de un mm de grosor con el extremo distal enroscado unas 10 vueltas.
• Jeringa de 10 ml con aguja del #22 desechable.
• Torundas de alcohol al 70%.
• Baño maría.

Material biológico:

• Sangre venosa obtenida con citrato de sodio.

Procedimiento:

1. En el tubo de centrifuga graduado, colocar 5 ml de sangre venosa recientemente extraída.
2. Tapar con el tubo de hule el tubo introduciendo el alambre de cobre hasta el fondo del tubo .
3. Incubarlo en baño maría a 37°C, durante una hora.
4. Transcurriendo ese tiempo, sacar cuidadosamente el alambre con el coagulo adherido, permitiendo que el plasma escurra dentro del tubo durante unos 2 minutos.
5. Leer el volumen que queda en el tubo y anotarlo como porcentaje con relación del volumen total de sangre inicial. Utilizando una regla de tres, de la siguiente manera:

Volumen inicial
5 ml ________ 100%

Volumen liquido
Exudado ________ X

Conclusión:

Es una prueba gruesa para medir la capacidad de las plaquetas para retraer el coagulo, aunque también es influida por el fibrinogeno y por el hematocrito. Es sencilla de realizar y si lleva un poco de tiempo realizar la por el tiempo en el que tiene que estar la muestra en el baño maría.

Valores de referencia:

Con este método la retracción del coagulo tiene como valores de referencia de 40 a 65%.

Resultados:

Prueba de Rumpel-Leede o del Torniquete

Introducción

La prueba de Rumpel-Leede, del lazo o de torniquete es una técnica que ofrece información sobre la fragilidad capilar, usada por ejemplo como diagnostico diferencial para enfermedades como el dengue y otros trastornos hemorrágicos por aumento de la fragilidad.

Material

-Torniquete
-Cronometro

Procedimiento

Consiste en someter el antebrazo del paciente a una presión intermedia entre la sistólica y la diastólica durante 5 minutos. Tras la retirada del manguito de presión y esperar a que la piel recupere su estado relajado se observa la zona presionada. El conteo de petequias producidas por la rotura capilar en un área de unos 10 cm² superior a 30 da positivo en el signo de Rumpel-Leede. 

Conclusión

Esta es una practica muy sencilla de elaborar, no lleva mucho tiempo hacerla y es muy fácil de dar los resultados.

VDRL (Venereal Disease Research Laboratory)

INTRODUCCION

La sífilis es una enfermedad venérea causada por Treponema pallidum,espiroqueta estrechamente enrollada, de unos 8 a 15um de largo. La enfermedad sin tratar pasa por tres etapas que se pueden prolongar durante muchos años.

La sífilis pocas veces se diagnostica mediante la demostración de organismos en una lesión primaria o secundaria. La fase terciaria que sobreviene después, es el resultado de la hipersensibilidad tisular de los antígenos treponémicos, no de la presencia de importantes microorganismos viables. Las pruebas serológicas son importantes para la demostración del Treponema pallidum, cuyo diagnóstico bacteriológico es muy difícil.

MATERIAL

· Placa excavada

· Pipeta Desechable

· Puntilla

· Reactivo de VDRL

· Muestra de suero

PROCEDIMIENTO

1) Separar el suero, y posteriormente agregar una gota de suero y una de suero control positivo. (en excavaciones diferentes)2) Añadir una gota de la suspensión del antígeno V.D.R.L. previamente agitado.3) Mezclar durante 4 min. (tiempo exacto). Puede dar un falso positivo si se deja reposando o se mezcla mas tiempo4) Observar al microscopio con el objetivo 10x

INTERPRETACIÓN DE RESULTADOS

A) Agregados grandes y medianos - Suero positivo.

B) Agregados finos y dispersos - Suero débilmente positivo.

C) No se observan agregados - Suero no positivo.

Se pueden producir falsas reacciones positivas en individuos con cuadros patológicos diversos como hepatitis, influenza, brucelosis, asma, lepra, malaria, tuberculosis, cáncer, diabetes y enfermedades autoinmunes.

CONCLUSIONES

Las practica, es muy sencilla de realizar, lo complicado es leer el resultado, si no se conoce muy bien al organismo responsable, pero después de practicar y conocerla mas, sera mas sencillo de reportar resultados. 

Introduccion 

Esta coloración es conocida como policromática debido a que produce varios colores. Es 

una solución de alcohol metílico de un colorante ácido (eosina) y otro básico (azul de 

metileno). El alcohol sirve como un fijador del frotis sanguíneo al portaobjetos. El 

amortiguador, que consiste en una solución tamponada, mantiene el pH del colorante y 

favorece la mejor absorción por los diferentes componentes celulares. 

Material

-Colorante de Wright

-Equipo de tincion

Tecnica

1. Cubrir completamente el portaobjetos o cubreobjetos con el colorante de Wright 

gota a gota. Dejarlo que permanezca en el frotis aproximadamente de 5-8 minutos, 

para fijar los glóbulos sanguíneos. El colorante deberá cubrir completamente el 

portaobjetos, pero no debe derramarse por los bordes. Deberá agregarse una 

cantidad adicional si éste se comienza a evaporar. 

2. Agregar directamente al colorante un volumen igual de amortiguador de Wright, 

para evitar la coloración débil. Esperar la formación de brillo metálico. Puede usarse 

de igual manera agua desionizada. Dejar actuar de 10-15 minutos. 

3. Lavar con agua en el chorro cuidadosamente hasta que la extensión presente un 

aspecto rosado al examinarlo a simple vista. 

4. Limpiar el dorso del portaobjetos con una gasa o algodón humedecido en alcohol 

para eliminar cualquier resto de colorante. 

5. Secar al aire y observar con el microscopio con el objetivo de inmersión. 

Resultados

Grupo Sanguíneo en Tubo

Principio

En la membrana del glóbulo rojo existen complejos químicos llamados antígenos que representan los llamados grupos o factores sanguíneos.

Se sabe que estos complejos químicos se han generado de una sustancia llamada precursora, llamada sustancia H (humana). Sobre esta sustancia se adhieren carbohidratos en un orden determinado. Para la sangre de tipo “O” se unen dos moléculas de galactosa, una de mucosa, una de glucosa y una de glucosaina.

Sobre esta cadena pude adherirse una nueva molécula y se cambia el tipo, si es glucosamina se tiene el grupo “A” y si es de galactosa se tiene el grupo “B”. Si se unen ambas moléculas en diversa posición se tiene el grupo “AB”:

Los primeros grupos sanguíneos que se descubrieron fueron los llamados ABO y actualmente se conocen muchos más.

Material

-tubos de ensaye

-aplicadores desechables de madera

-equipo de venopuncion

-centrifuga

Metodo

TECNICA.- Previa asepsia practicar venopunción y recoger 1 ml de sangre. Depositar en un tubo de ensaye una gota de sangre y 4.9 ml de so. Isotónica de NaCl al 0.9% para formar una suspensión de eritrocitos al 2%.

Marcar tres tubos de ensaye con las letras A, B, Rh respectivamente, depositar en el tubo A una gota de suero Anti A, en el tubo B una gota de suero Anti B y en el tubo Rh una gota de suero Anti D.

Añadir a cada tubo una gota de suspensión de eritrocitos al 2% (preparados con anterioridad).

Centrifugar a 1000 r.p.m. durante un minuto.

Sacar los tubos e inmediatamente observar si existe aglutinación.

Interpretación de resultados.

Grupo Sanguíneo                                                Antisueros

	Anti A	Anti B	Anti AB	Anti D
A	Aglutinación	No aglutinación	Aglutinación	No aglutinación
B	No aglutinación	Aglutinación	Aglutinación	No aglutinación
AB	Aglutinación	Aglutinación	Aglutinación	No aglutinación
O	No aglutinación	No aglutinación	No aglutinación	No Aglutinación
D	No aglutinación	No aglutinación	No aglutinación	Aglutinación

-Si existe aglutinación en el tubo Rh la sangre será de factor Rh positivo.

- Si no existe aglutinación en el tubo Rh la sangre será factor Rh negativo.

 RESULTADOS 

Yessenia.- se determina que el grupo sanguíneo es “O” Factor Rh positivo (+) ya que solo aglutina en el suero Anti D (placa superior).

Ricardo.- se determina que el grupo sanguíneo es “O” Factor Rh positivo (+) ya que solo aglutina en el suero Anti D (placa inferior izquierda).

Conclusión

Esta practica, aunque ya la habíamos realizado con anterioridad nos sirvió para mejorarla, es una practica muy sencilla de hacer. y su lectura no es muy complicada.