SIGNIFICADO CLINICO.
La
hemoglobina es una proteína que contiene hierro, otorga el color rojo a la
sangre. Se encuentra en los glóbulos rojos y es la encargada de transportar el
oxígeno por la sangre de los pulmones a los tejidos. Cuando el nivel de hemoglobina
aparece por debajo de los niveles normales indica anemia que puede obedecer a
diferentes causas: anemia primaria, cáncer, embarazo, enfermedades renales o
hemorragias. Si el nivel de hemoglobina es alto puede deberse a cardiopatías,
deshidratación o estancias en lugares con altitud. El diagnostica clínico debe
realizarse teniendo en cuenta todos los datos clínicos y de laboratorio.
MATERIAL.
· 2 Cubetas para espectrofotómetro.
· Gradilla.||
· Pipeta.
REACTIVO/MUESTRAS.
· Cianuro.
· Sangre con anticoagulante.
· Reactivo blanco.
Equipo de laboratorio.
· Espectrofotómetro.
PROCEDIMIENTO.
1. Condiciones del ensayo:
Longitud de
onda…………………..540 nm.
Cubeta…………………………..1
cm de paso.
Temperatura……………………….15-25
Grados C.
2. Ajustar espectrofotómetro a cero frente
a agua destilada.
3. Pipetear:
a) MÉTODO MACRO.
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BLANCO
|
PATRÓN
|
MUESTRA
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RT(ML)
|
5.0
|
5.0
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5.0
|
CALIBRADOR(µL)
|
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20
|
|
MUESTRA(µ
|
|
|
20
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b) METODO MICRO.
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BLANCO
|
PATRÓN
|
MUESTRA
|
RT(ML)
|
2.5
|
2.5
|
2.5
|
CALIBRADOR(µL)
|
|
10
|
|
MUETRA(µL)
|
|
|
|
4. Mezclar e incubar 3 minutos a
temperatura ambiente (15-25ºC).
5. Leer la absorbancia (A) del calibrador y
la muestra frente al Blanco del reactivo.
.
Cálculos:
- Con factor2
(A)Muestrax36.77=g/dL
de hemoglobina en la muestra.
- Con Patrón:
(A)
muestra/(A)Patron x15 (conc. del patron) = d/dL de Hb en la muestra.
Resultado=
Muestra
numero 1. 15.22 d /dL
Muestra
numero 2. 16.5 g/dL