domingo, 30 de marzo de 2014

Determinación de Hemoglobina (Hb)

SIGNIFICADO CLINICO.

La hemoglobina es una proteína que contiene hierro, otorga el color rojo a la sangre. Se encuentra en los glóbulos rojos y es la encargada de transportar el oxígeno por la sangre de los pulmones a los tejidos. Cuando el nivel de hemoglobina aparece por debajo de los niveles normales indica anemia que puede obedecer a diferentes causas: anemia primaria, cáncer, embarazo, enfermedades renales o hemorragias. Si el nivel de hemoglobina es alto puede deberse a cardiopatías, deshidratación o estancias en lugares con altitud. El diagnostica clínico debe realizarse teniendo en cuenta todos los datos clínicos y de laboratorio.

MATERIAL.

·         2 Cubetas para espectrofotómetro.
·         Gradilla.||
·         Pipeta.

REACTIVO/MUESTRAS.

·         Cianuro.
·         Sangre con anticoagulante.
·         Reactivo blanco.

Equipo de laboratorio.

·         Espectrofotómetro.

PROCEDIMIENTO.

1.       Condiciones del ensayo:
Longitud de onda…………………..540 nm.
Cubeta…………………………..1 cm de paso.
Temperatura……………………….15-25 Grados C.
2.       Ajustar espectrofotómetro a cero frente a agua destilada.
3.       Pipetear:
a)      MÉTODO MACRO.        


BLANCO
PATRÓN
MUESTRA
RT(ML)
5.0
5.0
5.0
CALIBRADOR(µL)

20

MUESTRA(µ


20

b)      METODO MICRO.

BLANCO
PATRÓN
MUESTRA
RT(ML)
2.5
2.5
2.5
CALIBRADOR(µL)

10

MUETRA(µL)




4.       Mezclar e incubar 3 minutos a temperatura ambiente (15-25ºC).
5.       Leer la absorbancia (A) del calibrador y la muestra frente al Blanco del reactivo.
.

Cálculos:

-         Con factor2 
(A)Muestrax36.77=g/dL de hemoglobina en la muestra.
- Con Patrón:
(A) muestra/(A)Patron x15 (conc. del patron) = d/dL de Hb en la muestra.
 Resultado= 
Muestra numero 1. 15.22 d /dL
Muestra numero 2. 16.5  g/dL

Conclusión

Como conclusión de esta práctica podemos aclarar que el resultado obtenido según los cálculos realizados, se encuentra dentro de los valores de referencia. El sujeto ofrecido para aportar la muestra de sangre era de sexo masculino, esto es importante a la hora de comparar los valores de referencia de la cantidad de hemoglobina en la sangre. El resultado obtenido; podemos aclarar que su nivel de hemoglobina es correcto.