Practica No. 13: Flotación de Faust - bis

FUNDAMENTO:

Este método se utiliza solución de Zn, cuya densidad especifica es de 1.180 (33%), que conforma un medio de densidad más alta que la de los huevos: Necator 1.055, Tricocéfalo 1.150, Ascaris fértil 1.110 y facilita que los huevos livianos de estos helmintos, con menor peso específico que la solución, se concentren y floten.

La concentración adecuada aconsejada es la que usa como reactivo una solución acuosa de sulfato Zn al 33% con una densidad al 1.180. El agua utilizada diluye y lava la materia fecal. El filtrado con gasa doblada y evita que los detritos gruesos traspasen las paredes, la centrifugación enriquece en la delgada película la superficie del líquido centrifugado con los huevos livianos de algunos helmintos.

Tipo de Muestra:

-3 muestras de heces fecales.

Material:

-3 Abate-lenguas de madera.

-3 Aplicadores de madera.

-3 Vasos de precipitados de 250 ml.

-3 Embudos de cristal.

-3 Portaobjetos de 25x76 mm.

-3 Cubreobjetos.

-1 Mechero.

Reactivos:

-Yodo Lugol.

Equipo:

-Microscopio.

TÉCNICA:

1. Mezclar bien una porción de materia fecal para preparar una superficie de 10 partes de agua destilada.

2.Filtrar la suspensión a través de un gasa doblada en cuatro, sobre un tubo de centrifuga, ayudándose con  un embudo pequeño.

3.Centrifugar el filtrado a 2500 rpm por 1 min.

4.Decantar el líquido sobrenadante y completar con agua hasta igualar la medida anterior, centrifugar nuevamente. Resuspender el sedimento.

5.Repetir el procedimiento 2 veces hasta que el líquido sobrenadante esté listo.

6.Decantar nuevamente el líquido sobrenadante reemplazándolo por igual cantidad de solución de sulfato de Zn al 33%. Mezclar bien la solución con el sedimento. Centrifugar durante 1 minuto a 1500 rpm.

7.Tomar de 3-4 gotas de las partículas que flotan en la superficie del líquido. Colocarlos en un porta objeto y mezclarla con 1-2 gotas de lugol, colocar cubre objeto.

8.Examinar al microscopio y reporte sus resultados.

CONCLUSIÓN:

La finalidad de la practica es la búsqueda de parásitos. y esta es una de las practicas mas recomendadas para encontrarlos, debido a su alta efectividad; es uno de los mas utilizados en los laboratorios. Esta practican al igual que la anterior, la realizamos para el reforzamiento de la misma, solo que esta vez, la muestra que nos toco fue de un paciente sano; y por esa razón solo localizamos fibras.

FOTOS:

Practica No. 12: Método de concentración- Flotación de Faust

Fundamento:

Este método se utiliza solución de Zn, cuya densidad especifica es de 1.180 (33%), que conforma un medio de densidad más alta que la de los huevos: Necator 1.055, Tricocéfalo 1.150, Ascaris fértil 1.110 y facilita que los huevos livianos de estos helmintos, con menor peso específico que la solución, se concentren y floten.

La concentración adecuada aconsejada es la que usa como reactivo una solución acuosa de sulfato Zn al 33% con una densidad al 1.180. El agua utilizada diluye y lava la materia fecal. El filtrado con gasa doblada y evita que los detritos gruesos traspasen las paredes, la centrifugación enriquece en la delgada película la superficie del líquido centrifugado con los huevos livianos de algunos helmintos.

Tipo de Muestra:

-3 muestras de heces fecales.

Material:

-3 Abate-lenguas de madera.

-3 Aplicadores de madera.

-3 Vasos de precipitados de 250 ml.

-3 Embudos de cristal.

-3 Portaobjetos de 25x76 mm.

-3 Cubreobjetos.

-1 Mechero.

Reactivos:

-Yodo Lugol.

Equipo:

-Microscopio.

Técnica:

1. Mezclar bien una porción de materia fecal para preparar una superficie de 10 partes de agua destilada.

2.Filtrar la suspensión a través de un gasa doblada en cuatro, sobre un tubo de centrifuga, ayudándose con  un embudo pequeño.

3.Centrifugar el filtrado a 2500 rpm por 1 min.

4.Decantar el líquido sobrenadante y completar con agua hasta igualar la medida anterior, centrifugar nuevamente. Resuspender el sedimento.

5.Repetir el procedimiento 2 veces hasta que el líquido sobrenadante esté listo.

6.Decantar nuevamente el líquido sobrenadante reemplazándolo por igual cantidad de solución de sulfato de Zn al 33%. Mezclar bien la solución con el sedimento. Centrifugar durante 1 minuto a 1500 rpm.

7.Tomar de 3-4 gotas de las partículas que flotan en la superficie del líquido. Colocarlos en un porta objeto y mezclarla con 1-2 gotas de lugol, colocar cubre objeto.

8.Examinar al microscopio y reporte sus resultados.

Conclusión:

La finalidad de la practica es la búsqueda de parásitos. y esta es una de las practicas mas recomendadas para encontrarlos, debido a su alta efectividad; es uno de los mas utilizados en los laboratorios.

Fotos:

Practica No. 1: Coproparasitoscopico en Fresco

Introducción: 

Como sabemos uno de los primeros microscopistas fue Antón Van Leeuwenhook y a mediados del siglo XVII fue el primero en utilizar este método al observar directamente en sus propias heces fecales, trofozoitos de Giardia lamblia.                                                                                                                    El método que necesitas es menos equipo y el más sencillo de realizar, corresponde a las preparaciones húmedas, que se hacen directamente con muestras de heces. Para las preparaciones directas de heces frescas o no preservadas, el formol sirve de diluyente.

Las preparaciones no teñidas son de especial valor para el estudio de parásitos vivos, como trofozoitos de protozoarios móviles, huevos helmitos y larvas de nematodos . El lugol se emplea principalmente para la búsqueda e identificación de quistes y larvas, con base a sus características. La mezcla normal en el tracto intestinal por lo general no asegura  una distribución uniforme de trofozoitos de protozoarios móviles, huevos de helmitos y larvas nematodos.

Sin embargo el examen de materia fecal directo o en fresco puede revelar o no parásitos, dependiendo de la intensidad de la infección.

Fundamentos:

La solución salina isotónica de las condiciones adecuadas para que las células se mantengan viva. El medio ideal para todo tipo de parásito que puede encontrarse en las muestras de heces, en cualquier etapa de su desarrollo es la solución salina fisiológica, y el lugol en la práctica ha demostrado su eficacia para la tinción e identificación de parásitos intestinales.

Tipo de Muestra:

-2 Muestras de heces fecales.

Material:

-4 Aplicadores de madera.

-4 Portaobjetos de 25x76 mm

-4 Cubreobjetos.

Reactivos:

-Solución salina isotónica

-Lugol parasitológico.

Equipo:

-Microscopio

Técnica:

Técnica. (La técnica se debe repetir por cada muestra tenida).

1.       En un portaobjetos coloca una gota de solución salina isotónica.

2.       Con la punta del aplicador toma una pequeña muestra de aprox. de 1 a 4 mg de heces, en muestras con moco y sangre elegir esta parte para estudiar.

3.       Mezclar procurando hacer una suspensión en preparación delgada y no un frotis.

4.       Quitar de la suspensión fibras y otros fragmentos grandes.

5.       Colocar el cubreobjetos lentamente procurando no dejar burbujas.

6.       Examinar al microscópico en forma sistemática a seco débil y a seco fuerte.

7.       Repetir la operación con una gota de lugol en lugar de la solución salina.

Reporte:

En la muestra la primera muestra se observó fibra normal y fibra vegetal. Lo importante se observó un  quiste del parásito.

Conclusión:

Esta es una practica de los mas común, usada en los Laboratorios Clínicos, es uno de los estudios mas económicos y rápido en realizarse, sin embargo es poco seguro, osea, tiene posibilidad de falsos negativos, por lo cual a veces es necesario repetir. En esta practica nos dimos cuenta de que en las heces fecales se puede detectar a la bacteria que causa la Amibiasis, el parásito de la Entamoeba Hystolitica, que se encuentra en forma de quistes o trofozoitos.