sábado, 18 de octubre de 2014

Retracción del Coagulo


Introducción:

El tapón hemostasico de plaquetas que se forma como resultado de la hemostasia primaria, crece hasta que consigue cerrar la abertura en el vaso. Durante este tiempo, las plaquetas del tapón metabolizan glucosa y producen atp de late energía este inicia la contracción de una proteína de las plaquetas parecida a la actinomiosina llamada trombostenina que es la causante de la retracción del coagulo. Esta retracción ocurre una vez estabilizado el coagulo, por contracción de las proteínas fibrilares del citoesqueleto plaquetario, de las glicoproteínas receptoras de membrana de la propia fibrina, el coagulo que se retrae queda firmemente adherido a la pared vascular.
Al contraerse el coagulo los hilos de fibrina se contraen gradualmente y expulsan el plasma del coagulo, aunque se retienen eritrocitos, plaquetas y otros elementos sólidos. El plasma expulsado del coagulo tiene poco o nada de fibrinógeno porque se ha convertido en fibrina y se llama suero. Para que ocurra retracción máxima del coagulo, la sangre debe poseer número adecuado de plaquetas.

Fundamento:

Al coagularse en forma espontánea la sangre, se forma una masa solida con todos los componentes sanguíneos. Con el tiempo, la acción de las plaquetas sobre la red de fibrina retrae el coagulo reduciendo su masa.

Material y aparatos: 

• Tubos de centrifuga de 10 ml graduados.
• Tapón de hule para los tubos con alambre de cobre de un mm de grosor con el extremo distal enroscado unas 10 vueltas.
• Jeringa de 10 ml con aguja del #22 desechable.
• Torundas de alcohol al 70%.
• Baño maría.

Material biológico:

• Sangre venosa obtenida con citrato de sodio.

Procedimiento:

1. En el tubo de centrifuga graduado, colocar 5 ml de sangre venosa recientemente extraída.
2. Tapar con el tubo de hule el tubo introduciendo el alambre de cobre hasta el fondo del tubo .
3. Incubarlo en baño maría a 37°C, durante una hora.
4. Transcurriendo ese tiempo, sacar cuidadosamente el alambre con el coagulo adherido, permitiendo que el plasma escurra dentro del tubo durante unos 2 minutos.
5. Leer el volumen que queda en el tubo y anotarlo como porcentaje con relación del volumen total de sangre inicial. Utilizando una regla de tres, de la siguiente manera:

Volumen inicial
5 ml ________ 100%

Volumen liquido
Exudado ________ X

Conclusión:

Es una prueba gruesa para medir la capacidad de las plaquetas para retraer el coagulo, aunque también es influida por el fibrinogeno y por el hematocrito. Es sencilla de realizar y si lleva un poco de tiempo realizar la por el tiempo en el que tiene que estar la muestra en el baño maría.

Valores de referencia:

Con este método la retracción del coagulo tiene como valores de referencia de 40 a 65%.

Resultados:







Prueba de Rumpel-Leede o del Torniquete

Introducción

La prueba de Rumpel-Leede, del lazo o de torniquete es una técnica que ofrece información sobre la fragilidad capilar, usada por ejemplo como diagnostico diferencial para enfermedades como el dengue y otros trastornos hemorrágicos por aumento de la fragilidad.


Material


-Torniquete
-Cronometro

Procedimiento

Consiste en someter el antebrazo del paciente a una presión intermedia entre la sistólica y la diastólica durante 5 minutos. Tras la retirada del manguito de presión y esperar a que la piel recupere su estado relajado se observa la zona presionada. El conteo de petequias producidas por la rotura capilar en un área de unos 10 cm2 superior a 30 da positivo en el signo de Rumpel-Leede. 

Conclusión

Esta es una practica muy sencilla de elaborar, no lleva mucho tiempo hacerla y es muy fácil de dar los resultados.

sábado, 4 de octubre de 2014

VDRL (Venereal Disease Research Laboratory)

INTRODUCCION

La sífilis es una enfermedad venérea causada por Treponema pallidum,espiroqueta estrechamente enrollada, de unos 8 a 15um de largo. La enfermedad sin tratar pasa por tres etapas que se pueden prolongar durante muchos años.

La sífilis pocas veces se diagnostica mediante la demostración de organismos en una lesión primaria o secundaria. La fase terciaria que sobreviene después, es el resultado de la hipersensibilidad tisular de los antígenos treponémicos, no de la presencia de importantes microorganismos viables. Las pruebas serológicas son importantes para la demostración del Treponema pallidum, cuyo diagnóstico bacteriológico es muy difícil.

MATERIAL

· Placa excavada

· Pipeta Desechable

· Puntilla

· Reactivo de VDRL

· Muestra de suero

PROCEDIMIENTO

1) Separar el suero, y posteriormente agregar una gota de suero y una de suero control positivo. (en excavaciones diferentes)2) Añadir una gota de la suspensión del antígeno V.D.R.L. previamente agitado.3) Mezclar durante 4 min. (tiempo exacto). Puede dar un falso positivo si se deja reposando o se mezcla mas tiempo4) Observar al microscopio con el objetivo 10x

INTERPRETACIÓN DE RESULTADOS

A) Agregados grandes y medianos - Suero positivo.
B) Agregados finos y dispersos - Suero débilmente positivo.
C) No se observan agregados - Suero no positivo.
Se pueden producir falsas reacciones positivas en individuos con cuadros patológicos diversos como hepatitis, influenza, brucelosis, asma, lepra, malaria, tuberculosis, cáncer, diabetes y enfermedades autoinmunes.

CONCLUSIONES

Las practica, es muy sencilla de realizar, lo complicado es leer el resultado, si no se conoce muy bien al organismo responsable, pero después de practicar y conocerla mas, sera mas sencillo de reportar resultados. 

domingo, 14 de septiembre de 2014

Introduccion 

Esta coloración es conocida como policromática debido a que produce varios colores. Es 
una solución de alcohol metílico de un colorante ácido (eosina) y otro básico (azul de 
metileno). El alcohol sirve como un fijador del frotis sanguíneo al portaobjetos. El 
amortiguador, que consiste en una solución tamponada, mantiene el pH del colorante y 
favorece la mejor absorción por los diferentes componentes celulares. 

Material

-Colorante de Wright
-Equipo de tincion

Tecnica


1. Cubrir completamente el portaobjetos o cubreobjetos con el colorante de Wright 
gota a gota. Dejarlo que permanezca en el frotis aproximadamente de 5-8 minutos, 
para fijar los glóbulos sanguíneos. El colorante deberá cubrir completamente el 
portaobjetos, pero no debe derramarse por los bordes. Deberá agregarse una 
cantidad adicional si éste se comienza a evaporar. 

2. Agregar directamente al colorante un volumen igual de amortiguador de Wright, 
para evitar la coloración débil. Esperar la formación de brillo metálico. Puede usarse 
de igual manera agua desionizada. Dejar actuar de 10-15 minutos. 

3. Lavar con agua en el chorro cuidadosamente hasta que la extensión presente un 
aspecto rosado al examinarlo a simple vista. 

4. Limpiar el dorso del portaobjetos con una gasa o algodón humedecido en alcohol 
para eliminar cualquier resto de colorante. 

5. Secar al aire y observar con el microscopio con el objetivo de inmersión. 

Resultados



Grupo Sanguíneo en Tubo

Principio

En la membrana del glóbulo rojo existen complejos químicos llamados antígenos que representan los llamados grupos o factores sanguíneos.
Se sabe que estos complejos químicos se han generado de una sustancia llamada precursora, llamada sustancia H (humana). Sobre esta sustancia se adhieren carbohidratos en un orden determinado. Para la sangre de tipo “O” se unen dos moléculas de galactosa, una de mucosa, una de glucosa y una de glucosaina.
Sobre esta cadena pude adherirse una nueva molécula y se cambia el tipo, si es glucosamina se tiene el grupo “A” y si es de galactosa se tiene el grupo “B”. Si se unen ambas moléculas en diversa posición se tiene el grupo “AB”:
Los primeros grupos sanguíneos que se descubrieron fueron los llamados ABO y actualmente se conocen muchos más.

Material

-tubos de ensaye
-aplicadores desechables de madera
-equipo de venopuncion
-centrifuga

Metodo


TECNICA.- Previa asepsia practicar venopunción y recoger 1 ml de sangre. Depositar en un tubo de ensaye una gota de sangre y 4.9 ml de so. Isotónica de NaCl al 0.9% para formar una suspensión de eritrocitos al 2%.
Marcar tres tubos de ensaye con las letras A, B, Rh respectivamente, depositar en el tubo A una gota de suero Anti A, en el tubo B una gota de suero Anti B y en el tubo Rh una gota de suero Anti D.
Añadir a cada tubo una gota de suspensión de eritrocitos al 2% (preparados con anterioridad).
Centrifugar a 1000 r.p.m. durante un minuto.
Sacar los tubos e inmediatamente observar si existe aglutinación.
Interpretación de resultados.

   Grupo
Sanguíneo                                                Antisueros


Anti A
Anti B
Anti AB
Anti D
A
Aglutinación
No aglutinación
Aglutinación
No aglutinación
B
No aglutinación
Aglutinación
Aglutinación
No aglutinación
AB
Aglutinación
Aglutinación
Aglutinación
No aglutinación
O
No aglutinación
No aglutinación
No aglutinación
No Aglutinación
D
No aglutinación
No aglutinación
No aglutinación
Aglutinación

-Si existe aglutinación en el tubo Rh la sangre será de factor Rh positivo.
- Si no existe aglutinación en el tubo Rh la sangre será factor Rh negativo.

 RESULTADOS 


Yessenia.- se determina que el grupo sanguíneo es “O” Factor Rh positivo (+) ya que solo aglutina en el suero Anti D (placa superior).

Ricardo.- se determina que el grupo sanguíneo es “O” Factor Rh positivo (+) ya que solo aglutina en el suero Anti D (placa inferior izquierda).

Conclusión

Esta practica, aunque ya la habíamos realizado con anterioridad nos sirvió para mejorarla, es una practica muy sencilla de hacer. y su lectura no es muy complicada.


sábado, 6 de septiembre de 2014

Grupo Sanguíneo en PLACA

INTRODUCCIÓN

Un grupo sanguíneo es una clasificación de la sangre de acuerdo con las características presentes o no en la superficie de los glóbulos rojos y suero de la sangre.
La nomenclatura de los grupos  sanguíneos se ha hecho de modo fragmentario, empleándose varios  sistemas.

MATERIALES:
♦  Placas de grupo sanguíneo o porta  objetos
♦  Lancetas desechables estériles
♦  Agitadores de madera
♦ Sueros: Anti – A, Anti – B y Anti – D

PROCEDIMIENTO:

1. Tome dos porta objetos limpios y secos (porta No. 1 y porta No. 2). En un extremo del porta No. 1 anote la frase anti – A, y en el otro extremo anote anti – B. En el porta No. 2 anote la frase anti - D o anti Rh

2. Limpie la yema de uno de los dedos de la mano, con un algodón empapado con alcohol y déjelo secar. Permita que su instructor le pinche el dedo con una lanceta desechable estéril. Apretando ligeramente el dedo, deposite una gota de sangre en cada extremo de la porta objeto No. 1 y una gota en el porta objeto No. 2. Con algodón estéril comprima la pequeña herida para impedir la salida de más sangre.

3. Rápidamente antes que se coagule la sangre, agregue en el extremo correspondiente del porta objeto No.1 una gota de suero anti – A y en el otro extremo una gota de suero anti – B. Al porta objeto No. 2, agréguele  una gota de suero anti – D. En las anteriores operaciones evite que la punta de los goteros de los sueros toque las gotas de sangre.

4. Usando un palillo diferente, agite cada una de éstas mezclas y observe si se produce o no aglutinación y registre los resultados.






CONCLUSIÓN

la practica de grupo sanguíneo en placa, es muy sencilla y rápida de hacer. 


viernes, 29 de agosto de 2014

Conteo de Leucocitos

FUNDAMENTO

Para el conteo de leucocitos, se usan métodos sistemáticos que son más rápidos y precisos, y los métodos manuales.
Todo método manual de recuento celular incluye 3 fases:
ü  Dilución de la sangre
ü  Muestreo de la sangre diluida en un volumen
ü  Recuento de células en ese volumen
Para el recuento de leucos se cuentan los 4 cuadrados de las esquinas, que corresponden a los  campos 1, 3,7 y 9.

MATERIAL

v  Pipeta de Thoma para glóbulos blancos (perla blanca)
v  Equipo para venopuncion (Tubo lila)
v  Tubos de ensayo
v  Papel parafilm
v  Cámara de Neubauer
v  Cubrehematimetro
v  Microscopio
v  Gasas


PROCEDIMIENTO

1.    Colocar el tubo de plástico y la boquilla para aspirar en la pipeta

2.    Llenar la pipeta de glóbulos blancos con sangre hasta la marca 0.5 para realizar una dilución de 1/20. Limpiar la punta con gasa o papel absorbente. Si la sangre se pasa de la marca, se puede absorber con gasa el excedente.

3.    Introducir la pipeta en el tubo que contiene el diluyente (liquido de Turk) y absorber hasta la marca 11, no deben quedar burbujas.

4.    Se tapan ambos extremos de la pipeta con papel parafilm y se coloca en un rotador automático o se hace rotar manualmente de 3 a 5 min.

5.    Montar la laminilla de vidrio en la cámara para recuento. Debe estar limpia y seca.

6.    Destapar la pipeta y descartar 3 a 4 gotas del tallo, luego colocar una gota pequeña cerca de un extremo de la cámara para que por capilaridad se llene exactamente.

7.    Dejar 5 minutos  que los leucocitos se sedimenten

9.    Colocar en la platina del microscopio y enfocar la cuadricula a 10x. y contar  en los 4 cuadrados angulares.

10. En el recuento se incluyen las células que cubren o tocan por dentro o por fuera las líneas limitantes superior e izquierda en el cuadro pequeño de recuento y no se consideran los que estén en los límites inferior y derecho.

11.Multiplicar el numero contado de leucocitos por 50.

VALORES NORMALES

de 5,000 a 10,000/mm3

RESULTADOS


 

CONCLUSIÓN

No pudimos observar bien los resultados de la practica, ya que uno de los microscopios de laboratorio no estaba en función, y en el otro, se seco la muestra; sin embargo pudimos notar que es una practica muy sencilla de realizar, ya que hemos realizado varias practicas similares.


domingo, 11 de mayo de 2014

Recuento de Reticulositos



OBJETIVO: Que el alumno aprenda a identificar y cuantificar correctamente a los reticulositos.

INTRODUCCÓN: Los reticulocitos son eritrocitos jóvenes y contienen a su interior RNA – ribosomas el cual puede observarse en forma de red (de ahí su nombre) mediante un colorante supreavital.
Cuando una medula osea aumenta la eritropoyesis, aumenta también el número dereticulocitos que salen hacia la circulación.

MATERIAL, REACTIVOS Y EQUIPO.
Sangre venosa con EDTA
Colorante de azul de cresil brillante o nuevo azul de metileno
Tubos de ensaye
Porta objetos
Pipetas pasteur tallo corto con bulbo
Baño maria
Microscopio
Aceite de inmersión

PROCEDIMIENTO.
1.- Mezclar la muestra sanguínea y en un tubo de ensaye colocar 5 gotas con una pipeta pasteur.
2.- Agrégale 5 gotas de colorante con una pipetapasteur y mezclar
3.- Incubar el tubo de ensaye a 37° C durante un minuto en el baño maria
4.- Mezclar la suspensión y realizar un frotis en portaobjetos
5.- Dejarlo secar a Temp.. ambiente, agregarle una gota de aceite de inmersión y observar con el objetivo 100 X.
6.- Buscar células que presenten una red con coloración azul (reticulocitos). Contar 1000 eritrocitos en diferentes partes del frotis e ir registrando el número de reticulocitos observados.


RESULTADO: Numero de reticulocitos observados x 100
   Numero total de eritrocitos.


VALOR DE REFERENCIA
ADULTOS         0.5 – 2.0%
RECIEN NACIDOS 2.5 – 6.5%

domingo, 27 de abril de 2014

Índices Eritrocitarios


HEMOGLOBINA:
Estándar = .363
Muestra = .590
Valor muestra  x 10 = Hb g/dl 
    Estándar
.590 x 10 = 16.25 Hb g/dl
.363
Hb: 16.25 g/dl

CONTEO ERITROCITARIO                              
N. de eritrocitos x 10,000 = N. de eritrocitos /udl
421 x 10.000 = 5,180,000 /udl
4.21 x 10,000 /udl 
4.21 x 10,000 /udl                                

VALOR DE HEMATOCRITO
43%                         
Valores de referencia  42 - 48%


V.C.C                                                            Valores de referencia 82-92 en M^3
Valor de Hto            x 10 = V.C.C.  en M^3
No. De eritrocitos / dl
     
     43                     x 10 = 102.13 en M^3
4.21 /udl

H.C.M.                                                          Valores de referencia 28-32 pg
       Hb gr/dl                            x 10 = H.C.M. pg
No. Eritrocitos / l

      16.25 gr/dl                          x 10 = 38.59 pg
    4.21 x 10,000



C.H.C.M.                                                        Valores de referencia 32-36 %
       Hb gr/dl                  x 10 = C.H.C.M.  en % 
Valor de Hto %

      16.25 g/dl             x 10 = 37.79 %
           4.3 %