Introduccion 

Esta coloración es conocida como policromática debido a que produce varios colores. Es 

una solución de alcohol metílico de un colorante ácido (eosina) y otro básico (azul de 

metileno). El alcohol sirve como un fijador del frotis sanguíneo al portaobjetos. El 

amortiguador, que consiste en una solución tamponada, mantiene el pH del colorante y 

favorece la mejor absorción por los diferentes componentes celulares. 

Material

-Colorante de Wright

-Equipo de tincion

Tecnica

1. Cubrir completamente el portaobjetos o cubreobjetos con el colorante de Wright 

gota a gota. Dejarlo que permanezca en el frotis aproximadamente de 5-8 minutos, 

para fijar los glóbulos sanguíneos. El colorante deberá cubrir completamente el 

portaobjetos, pero no debe derramarse por los bordes. Deberá agregarse una 

cantidad adicional si éste se comienza a evaporar. 

2. Agregar directamente al colorante un volumen igual de amortiguador de Wright, 

para evitar la coloración débil. Esperar la formación de brillo metálico. Puede usarse 

de igual manera agua desionizada. Dejar actuar de 10-15 minutos. 

3. Lavar con agua en el chorro cuidadosamente hasta que la extensión presente un 

aspecto rosado al examinarlo a simple vista. 

4. Limpiar el dorso del portaobjetos con una gasa o algodón humedecido en alcohol 

para eliminar cualquier resto de colorante. 

5. Secar al aire y observar con el microscopio con el objetivo de inmersión. 

Resultados

Grupo Sanguíneo en Tubo

Principio

En la membrana del glóbulo rojo existen complejos químicos llamados antígenos que representan los llamados grupos o factores sanguíneos.

Se sabe que estos complejos químicos se han generado de una sustancia llamada precursora, llamada sustancia H (humana). Sobre esta sustancia se adhieren carbohidratos en un orden determinado. Para la sangre de tipo “O” se unen dos moléculas de galactosa, una de mucosa, una de glucosa y una de glucosaina.

Sobre esta cadena pude adherirse una nueva molécula y se cambia el tipo, si es glucosamina se tiene el grupo “A” y si es de galactosa se tiene el grupo “B”. Si se unen ambas moléculas en diversa posición se tiene el grupo “AB”:

Los primeros grupos sanguíneos que se descubrieron fueron los llamados ABO y actualmente se conocen muchos más.

Material

-tubos de ensaye

-aplicadores desechables de madera

-equipo de venopuncion

-centrifuga

Metodo

TECNICA.- Previa asepsia practicar venopunción y recoger 1 ml de sangre. Depositar en un tubo de ensaye una gota de sangre y 4.9 ml de so. Isotónica de NaCl al 0.9% para formar una suspensión de eritrocitos al 2%.

Marcar tres tubos de ensaye con las letras A, B, Rh respectivamente, depositar en el tubo A una gota de suero Anti A, en el tubo B una gota de suero Anti B y en el tubo Rh una gota de suero Anti D.

Añadir a cada tubo una gota de suspensión de eritrocitos al 2% (preparados con anterioridad).

Centrifugar a 1000 r.p.m. durante un minuto.

Sacar los tubos e inmediatamente observar si existe aglutinación.

Interpretación de resultados.

Grupo Sanguíneo                                                Antisueros

	Anti A	Anti B	Anti AB	Anti D
A	Aglutinación	No aglutinación	Aglutinación	No aglutinación
B	No aglutinación	Aglutinación	Aglutinación	No aglutinación
AB	Aglutinación	Aglutinación	Aglutinación	No aglutinación
O	No aglutinación	No aglutinación	No aglutinación	No Aglutinación
D	No aglutinación	No aglutinación	No aglutinación	Aglutinación

-Si existe aglutinación en el tubo Rh la sangre será de factor Rh positivo.

- Si no existe aglutinación en el tubo Rh la sangre será factor Rh negativo.

 RESULTADOS 

Yessenia.- se determina que el grupo sanguíneo es “O” Factor Rh positivo (+) ya que solo aglutina en el suero Anti D (placa superior).

Ricardo.- se determina que el grupo sanguíneo es “O” Factor Rh positivo (+) ya que solo aglutina en el suero Anti D (placa inferior izquierda).

Conclusión

Esta practica, aunque ya la habíamos realizado con anterioridad nos sirvió para mejorarla, es una practica muy sencilla de hacer. y su lectura no es muy complicada.

Grupo Sanguíneo en PLACA

INTRODUCCIÓN

Un grupo sanguíneo es una clasificación de la sangre de acuerdo con las características presentes o no en la superficie de los glóbulos rojos y suero de la sangre.

La nomenclatura de los grupos  sanguíneos se ha hecho de modo fragmentario, empleándose varios  sistemas.

MATERIALES:

♦  Placas de grupo sanguíneo o porta  objetos

♦  Lancetas desechables estériles

♦  Agitadores de madera

♦ Sueros: Anti – A, Anti – B y Anti – D

PROCEDIMIENTO:

1. Tome dos porta objetos limpios y secos (porta No. 1 y porta No. 2). En un extremo del porta No. 1 anote la frase anti – A, y en el otro extremo anote anti – B. En el porta No. 2 anote la frase anti - D o anti Rh

2. Limpie la yema de uno de los dedos de la mano, con un algodón empapado con alcohol y déjelo secar. Permita que su instructor le pinche el dedo con una lanceta desechable estéril. Apretando ligeramente el dedo, deposite una gota de sangre en cada extremo de la porta objeto No. 1 y una gota en el porta objeto No. 2. Con algodón estéril comprima la pequeña herida para impedir la salida de más sangre.

3. Rápidamente antes que se coagule la sangre, agregue en el extremo correspondiente del porta objeto No.1 una gota de suero anti – A y en el otro extremo una gota de suero anti – B. Al porta objeto No. 2, agréguele  una gota de suero anti – D. En las anteriores operaciones evite que la punta de los goteros de los sueros toque las gotas de sangre.

4. Usando un palillo diferente, agite cada una de éstas mezclas y observe si se produce o no aglutinación y registre los resultados.

CONCLUSIÓN

la practica de grupo sanguíneo en placa, es muy sencilla y rápida de hacer. 

Conteo de Leucocitos

FUNDAMENTO

Para el conteo de leucocitos, se usan métodos sistemáticos que son más rápidos y precisos, y los métodos manuales.

Todo método manual de recuento celular incluye 3 fases:

ü  Dilución de la sangre

ü  Muestreo de la sangre diluida en un volumen

ü  Recuento de células en ese volumen

Para el recuento de leucos se cuentan los 4 cuadrados de las esquinas, que corresponden a los  campos 1, 3,7 y 9.

MATERIAL

v  Pipeta de Thoma para glóbulos blancos (perla blanca)

v  Equipo para venopuncion (Tubo lila)

v  Tubos de ensayo

v  Papel parafilm

v  Cámara de Neubauer

v  Cubrehematimetro

v  Microscopio

v  Gasas

PROCEDIMIENTO

1.    Colocar el tubo de plástico y la boquilla para aspirar en la pipeta

2.    Llenar la pipeta de glóbulos blancos con sangre hasta la marca 0.5 para realizar una dilución de 1/20. Limpiar la punta con gasa o papel absorbente. Si la sangre se pasa de la marca, se puede absorber con gasa el excedente.

3.    Introducir la pipeta en el tubo que contiene el diluyente (liquido de Turk) y absorber hasta la marca 11, no deben quedar burbujas.

4.    Se tapan ambos extremos de la pipeta con papel parafilm y se coloca en un rotador automático o se hace rotar manualmente de 3 a 5 min.

5.    Montar la laminilla de vidrio en la cámara para recuento. Debe estar limpia y seca.

6.    Destapar la pipeta y descartar 3 a 4 gotas del tallo, luego colocar una gota pequeña cerca de un extremo de la cámara para que por capilaridad se llene exactamente.

7.    Dejar 5 minutos  que los leucocitos se sedimenten

9.    Colocar en la platina del microscopio y enfocar la cuadricula a 10x. y contar  en los 4 cuadrados angulares.

10. En el recuento se incluyen las células que cubren o tocan por dentro o por fuera las líneas limitantes superior e izquierda en el cuadro pequeño de recuento y no se consideran los que estén en los límites inferior y derecho.

11.Multiplicar el numero contado de leucocitos por 50.

VALORES NORMALES

de 5,000 a 10,000/mm3

RESULTADOS

 

CONCLUSIÓN

No pudimos observar bien los resultados de la practica, ya que uno de los microscopios de laboratorio no estaba en función, y en el otro, se seco la muestra; sin embargo pudimos notar que es una practica muy sencilla de realizar, ya que hemos realizado varias practicas similares.

Recuento de Reticulositos

OBJETIVO: Que el alumno aprenda a identificar y cuantificar correctamente a los reticulositos.

INTRODUCCÓN: Los reticulocitos son eritrocitos jóvenes y contienen a su interior RNA – ribosomas el cual puede observarse en forma de red (de ahí su nombre) mediante un colorante supreavital.

​Cuando una medula osea aumenta la eritropoyesis, aumenta también el número dereticulocitos que salen hacia la circulación.

MATERIAL, REACTIVOS Y EQUIPO.

Sangre venosa con EDTA

Colorante de azul de cresil brillante o nuevo azul de metileno

Tubos de ensaye

Porta objetos

Pipetas pasteur tallo corto con bulbo

Baño maria

Microscopio

Aceite de inmersión

PROCEDIMIENTO.

1.- Mezclar la muestra sanguínea y en un tubo de ensaye colocar 5 gotas con una pipeta pasteur.

2.- Agrégale 5 gotas de colorante con una pipetapasteur y mezclar

3.- Incubar el tubo de ensaye a 37° C durante un minuto en el baño maria

4.- Mezclar la suspensión y realizar un frotis en portaobjetos

5.- Dejarlo secar a Temp.. ambiente, agregarle una gota de aceite de inmersión y observar con el objetivo 100 X.

6.- Buscar células que presenten una red con coloración azul (reticulocitos). Contar 1000 eritrocitos en diferentes partes del frotis e ir registrando el número de reticulocitos observados.

RESULTADO: Numero de reticulocitos observados x 100

​​   Numero total de eritrocitos.

VALOR DE REFERENCIA

ADULTOS         0.5 – 2.0%

RECIEN NACIDOS 2.5 – 6.5%

Índices Eritrocitarios



HEMOGLOBINA:

Estándar = .363
Muestra = .590

Valor muestra  x 10 = Hb g/dl 
    Estándar

.590 x 10 = 16.25 Hb g/dl
.363

Hb: 16.25 g/dl



CONTEO ERITROCITARIO                              

N. de eritrocitos x 10,000 = N. de eritrocitos /udl

421 x 10.000 = 5,180,000 /udl
4.21 x 10,000 /udl 
4.21 x 10,000 /udl                                



VALOR DE HEMATOCRITO

43%                         
Valores de referencia  42 - 48%

V.C.C                                                            Valores de referencia 82-92 en M^3

Valor de Hto            x 10 = V.C.C.  en M^3
No. De eritrocitos / dl

     

     43                     x 10 = 102.13 en M^3
4.21 /udl

H.C.M.                                                          Valores de referencia 28-32 pg

       Hb gr/dl                            x 10 = H.C.M. pg
No. Eritrocitos / l

      16.25 gr/dl                          x 10 = 38.59 pg
    4.21 x 10,000

C.H.C.M.                                                        Valores de referencia 32-36 %

       Hb gr/dl                  x 10 = C.H.C.M.  en % 
Valor de Hto %

      16.25 g/dl             x 10 = 37.79 %
           4.3 %

Hematocrito

Introducción: 

El hematocrito  es el volumen que ocupan los eritrocitos en una muestra sanguínea y se expresan en porcentaje.

La determinación de hematocrito es un método sencillo y confiable para detectar anemia o policitemia.

El hematocrito se puede determinar por dos métodos:

1.       Macrometodo (Wintrobe)

2.       Micrometodo

Material y reactivos

Tubo de wintrobe                      Sangre venosa

Tubo capilar plastilina

Plastilina

Centrifuga

Microcentrifuga

Pipeta pasteur tallo largo

Equipo para venopunción

Lector para hematocrito o regla

Macrometodo

1.       Mezclar la muestra sanguínea suavemente y con una pipeta pasteur o canula llenar el tubo de wintrobe, colocando la punta de la pipeta hasta el fondo del tubo, la punta de la pipeta se va elevando pero permaneciendo por debajo del menisco de sangre para evitar la formación de burbujas o espuma.

2.       El tubo se llena hasta la marca 100 con la muestra sanguínea y se pone a centrifugar durante 30 minutos a 3,000 r.p.m.

Micrometodo

1.       Mezclar la muestra sanguínea adecuadamente y llenar el tubo capilar hasta 2/3 partes.

1.       El extremo vacío que no estuvo en contacto con la sangre se sella con plastilina o con calor.

2.       El tubo con la muestra sanguínea se coloca en la microcentrifuga a 10,000 r.p.m. durante 10 minutos.

3.       Leer el porcentaje de hematocrito en el lector o medirlo con una regla.

      Conclusión

El realizar pruebas de Hematocrito resulta algo laborioso, y lo es, es necesario tener cuidado al llenar el tubo de wintrobe y el capilar, para que no contengan burbujas de aire. y al sellar el tubo capilar para que al centrifugar no se salga la plastilina o la sangre, o simplemente no se rompa el tubo y tengamos que repetirlo. Al momento de interpretar los resultados ya es un poco mas facil pues los cálculos son menos complicado y son mas exactos que en otros análisis